1. Составьте схему приготовления реакционной смеси для постановки ПЦР. 2. Напишите протокол проведения амплификации по методу классической ПЦР. Лаборанту молекулярно-генетической лаборатории необходимо провести
- Биология
Условие:
Лаборанту молекулярно-генетической лаборатории необходимо провести анализ крови человека на присутствие ВИЧ методом ПЦР. Тотальная ДНК выделена методом фенол-хлороформной экстракции, итоговая концентрация ДНК составляет 100 нг/мкл. В распоряжении лаборанта Taq-полимераза с концентрацией 2 единицы/мкл, 10x буфер для Taq-полимеразы, раствор хлорида магния с концентрацией 25 мМ, раствор четырех дезоксинуклеотидтрифосфатов с концентрацией 2,5 мМ, раствор прямого и обратного праймеров, комплементарных ДНК вируса, с концентрацией 20 мМ каждый (температура отжига праймеров – 60°С), а также деионизированная вода. Размер целевого ПЦР-продукта составляет 300 пар оснований (п.о.). Общий объем реакционной смеси ПЦР составляет 25 мкл.
1. Составьте схему приготовления реакционной смеси для постановки ПЦР.
2. Напишите протокол проведения амплификации по методу классической ПЦР.
Решение:
Задание 1:
Для подготовки реакционной смеси для ПЦР необходимо взять следующие реагенты и добавить их в трубку объемом 0,2 мл:
ДНК-шаблон (100 нг/мкл) 2 мкл (200 нг ДНК)
10x буфер для Taq-полимеразы 2,5 мкл
25 мМ раствор хлорида магния 1 мкл
2,5 мМ раствор каждого дезоксинуклеотидтрифосфата 0,5 мкл
Раствор прямого праймера (20 мМ) 0,5 мкл
Раствор обратного праймера (20 мМ) ...
Похожие задачи
Не нашел нужную задачу?
Воспользуйся поиском
AI помощники
Выбери предмет
- Правоохранительные органы
- Пожарная безопасность
- Парикмахерское искусство
- Природообустройство и водопользование
- Почвоведение
- Приборостроение и оптотехника
- Промышленный маркетинг и менеджмент
- Производственный маркетинг и менеджмент
- Процессы и аппараты
- Программирование
- Право и юриспруденция
- Психология
- Политология
- Педагогика
- Трудовое право
- Теория государства и права (ТГП)
- Таможенное право
- Теория игр
- Теория вероятностей
- Теоретическая механика
- Теория управления
- Технология продовольственных продуктов и товаров
- Технологические машины и оборудование
- Теплоэнергетика и теплотехника
- Туризм
- Товароведение
- Таможенное дело
- Торговое дело
- Теория машин и механизмов
- Транспортные средства